所需试剂:限制性内切酶,对应缓冲液,质粒,水。
一种内切酶体系如下:
质粒 3 ug
内切酶 10 IU
10x缓冲液 5 uL
ddH2O 补足至50 uL
37℃酶切1 h(如果是快切酶且最适温度是37℃的话),否则过夜。
两种内切酶体系如下:
质粒 3 ug
内切酶 10 IU
内切酶 10 IU
10x缓冲液 5 uL
ddH2O 补足至50 uL
37℃酶切1 h(如果是快切酶且最适温度是37℃的话),否则过夜。
PS:
酶切过后还需要80℃灭活30 min。