×

流式准备

jiong jiong 发表于2026-04-06 16:59:08 浏览15 评论0

抢沙发发表评论

所需试剂：0.05 T胰酶，0.1 T胰酶，含2.5%或10% FBS的MEF，PBS，DMEM。

快速准备法（293T）：

  1. 弃去培养基，加入PBS涮洗三下，弃去PBS。

  2. 加入0.1T 胰酶，孵育10s，弃去胰酶。

  3. 静置1 min，同时敲打培养皿，待细胞全脱落了，加入100 uL 含2.5% FBS的MEF。

  4. 吹打，转移至流式管。

  5. 准备回收管，每管200 uL PBS。

一般准备法：

  1. 弃去培养基，加入PBS涮洗三下，弃去PBS。

  2. 加入适量0.1T （0.05 T）胰酶，37℃孵育2 min。

  3. 敲打培养皿，待细胞全脱落了，加入适量含10% FBS的MEF。

  4. 吹打，转移至1.5 mL离心管，4000 rpm离心 20s。

  5. 弃去上清，每管加入70 uL DMEM。

  6. 转移至流式管。

  7. 准备回收管，每管200 uL PBS。