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粗提质粒

jiong jiong 发表于2026-04-06 16:27:35 浏览15 评论0

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所需试剂:P1、P2、P3、70%~80%乙醇水溶液和异丙醇。

  1. 1 mL LB培养基接菌,摇至浑浊,约8h。

  2. (可选)保菌50 uL。

  3. 12000g离心10s,弃去上清。

  4. 加入50 uL P1,涡旋振荡至沉淀消失。

  5. 加入50 uL P2,颠倒混匀7次。

  6. 准备新的1.5 mL离心管,每管加入105 uL异丙醇。

  7. 加入50 uL P3中和5中的P2,颠倒混匀21次,此时出现白色絮状物。

  8. 最大转速离心1 min,将上清液导入6中的1.5 mL管。颠倒混匀7次。

  9. 12000g离心2 min,弃去上清液。

  10. 加入105 uL 70%~80%乙醇水溶液,涮洗,最大转速离心1 min。

  11. 弃去上清,最大转速空离1 min。

  12. 用枪吸弃上清液,开盖静置5 min。

  13. 用20 uL提前预热55℃的EB溶解沉淀。


PS:

倒上清时,侧着倒,这样沉淀不容易掉。