所需试剂:P1、P2、P3、70%~80%乙醇水溶液和异丙醇。
1 mL LB培养基接菌,摇至浑浊,约8h。
(可选)保菌50 uL。
12000g离心10s,弃去上清。
加入50 uL P1,涡旋振荡至沉淀消失。
加入50 uL P2,颠倒混匀7次。
准备新的1.5 mL离心管,每管加入105 uL异丙醇。
加入50 uL P3中和5中的P2,颠倒混匀21次,此时出现白色絮状物。
最大转速离心1 min,将上清液导入6中的1.5 mL管。颠倒混匀7次。
12000g离心2 min,弃去上清液。
加入105 uL 70%~80%乙醇水溶液,涮洗,最大转速离心1 min。
弃去上清,最大转速空离1 min。
用枪吸弃上清液,开盖静置5 min。
用20 uL提前预热55℃的EB溶解沉淀。
PS:
倒上清时,侧着倒,这样沉淀不容易掉。