×

试剂盒法胶/PCR回收DNA

jiong jiong 发表于2026-04-06 14:11:10 浏览15 评论0

抢沙发发表评论

胶回收:

  1. 切下目的条带,置于2 mL管,加入300 uL GDP(漫过胶块)。

  2. 置于60℃溶胶胶。

  3. 加入0.7倍液体体积的异丙醇。混匀,静置1 min。

  4. 准备吸附柱,做好标记。

  5. 每次转移700 uL至吸附柱,弃去滤液,知道2 mL管液体转移完毕。

  6. 每管加入300 uL GDP。静置1 min。

  7. 12000g 离心 1 min。

  8. 加入700 uL GW,12000g 离心 10s。

  9. 重复8。

  10. 12000g 空离2 min。

  11. 准备新的1.5 mL管,将吸附柱转移至新管,开盖静置5 min。

  12. 提前预热EB于55℃。每管20 uL,静置1 min。最大转速 离心 30s。

  13. 将1.5 mL管中液体再次加入吸附柱,最大转速 离心 30s。

  14. 继续后续实验或者冻于-20℃。


PCR:

  1. 用无菌水将PCR体积补足至100 uL。

  2. 加入300 uL GDP,加入300 uL 异丙醇。混匀,静置1 min。

  3. 后续同《胶回收》步骤4~14。