适用于：获取细胞转染级的质粒
提取前一天，15 mL培养基接菌。至提取时，摇菌12 h~16 h。
5000 rpm离心5 min，弃去上清液。5000 rpm离心1 min，用枪吸弃上清液。
500 uL S1重悬菌体沉淀，转移至2 mL管。37℃静置10 min。
500 uL S2裂解菌体，颠倒7次。
打冰。每管再加入250 uL N3，颠倒混匀51次。最高转速5 min。
准备新的1.5 mL，每管加入125 uL ETR。
将5中的离心后上清倒入6中的1.5 mL管中，混匀，插入冰上，静置10 min，期间多次颠倒，溶液变无色透明。
提前打开42℃金属浴，在10 min后将1.5 mL管置于42℃，孵育5 min，可见溶液变浑浊。
准备新的2 mL管，每管加入625 uL乙醇（0.5倍液体体积）。
12000 g 3 min离心，用枪吸取上清转移至9的2 mL管。颠倒混匀。
准备吸附柱，每根柱加250 uL 3M NaOH，12000 g 离心1 min。弃去滤液。
将10中2 mL管液体按每次700 uL转移至吸附柱，12000 g 离心10 s，弃去滤液，直到2 mL管中液体转移完。
将500 uL HBC 加入吸附柱，12000g 离心1 min，弃去滤液。
将700 uL washing buffer加入吸附柱，12000g 离心10s，弃去滤液。
重复14。
12000g 空离 2min。
准备新的1.5 mL管，将空离后的柱子转移到1.5 mL管，开盖静置5 min。
提前预热EB于55℃。每根柱子加60 uL EB，静置1 min，最大转速离心 30 s。
将1.5 mL管中液体再次加入吸附柱，最大转速离心 30 s。
测浓度。
PS：
步骤4，孵育时间不超过5 min，混匀时轻柔，以免破坏基因组。
步骤7溶液不透明，可能是步骤5颠倒次数不足，或者离心速度（时间）不足。
如果最后浓度很低（260/230位于1.8~2.0），但是初始菌体很多，可能是①抗生素失效；②3M NaOH不新鲜；③EB没预热；④HBC或者washing buffer未加异丙醇或无水乙醇。
